將采集得來(lái)的回收冬蟲夏草經(jīng)過(guò)滅菌處理
(1)將采集得來(lái)的冬蟲夏草經(jīng)過(guò)滅菌處理,在潔凈空氣的環(huán)境 中用蒸餾水加以洗凈.在無(wú)菌的條件下,用低溫烘干切取內(nèi)部組織 的切片或抱子作為原菌。
(2)分離用的培養(yǎng)基成分為葡萄糖1.0%、蛋白陳0.1%、維生 素B10.01%、維生素B20.01 %、維生素B120-01%、一磷酸腺昔 0.2%、二磷酸腺昔0.2%、三磷酸腺普0.2%、檸檬酸0.04%、瓊 脂20.0%.在pH值為4和溫度為15℃下,把原菌移人培養(yǎng)基 里,用試管進(jìn)行斜面培養(yǎng),經(jīng)30天可見子座形成.
(3)經(jīng)過(guò)純分離培養(yǎng)的子座,在立體培養(yǎng)基里培養(yǎng).這種立體 培養(yǎng)基,可用分離培養(yǎng)基的成分(用米飯代替瓊脂).當(dāng)出現(xiàn)子座 時(shí),就可以認(rèn)為是純的蟲草菌.然后移人液體培養(yǎng)基中.
(4)把得到的菌絲同培養(yǎng)基一同取出來(lái),同水或培養(yǎng)液混合, 振蕩搖碎.然后用紗布過(guò)濾.濾液(即菌絲體和一些碎的基質(zhì))作液 體培養(yǎng)用,pH值為4,培養(yǎng)溫度為25t,培養(yǎng)基的成分采用前面 的分離培養(yǎng)基成分,只是把瓊脂換成水,并添加人0.5%的動(dòng)物血 即可。把它放入容量為1000毫升的三角瓶中,培養(yǎng)基的加人量為 50毫升,然后用牛皮紙罩把瓶口封上.
(5)形成菌座后,就長(zhǎng)出子座.子座和菌座的菌體組成成分是 一樣的,到45天.就可產(chǎn)菌3.0-8.5克,這種差異與菌種類別等 條件有關(guān). |